Expression of AIF, PARP, and miRNAs MIR-145, MIR-210, and MIR-486 associated with apoptosis in the corpus cavernosum of rats subjected to chronic alcoholism model / Expresión de AIF, PARP y miRNAs MIR-145, MIR-210 y MIR-486 asociados con apoptosis en el cuerpo cavernoso de ratas sometidas a modelo de alcoholismo crónico

SUMMARY: Previous studies from our group described the consequences of using ethanol on penile erection. Nevertheless, the molecular mechanisms surrounding microRNAs, apoptosis process and their relationship with erectile dysfunction associated with alcohol consumption are still poorly understood. The objective of this analysis was to evaluate the mechanism of apoptosis by the expression of AIF and PARP, as well as their regulatory microRNAs: miR-145, miR-210 and miR-486, in the corpus cavernosum of rats submitted to a semivoluntary alcoholism model. For this study 24 Wistar rats were divided into two groups: control (C) and treated with 20 % ethanol (A) for seven weeks. The corpus cavernosum samples were prepared for immunohistochemical analysis of AIF and PARP protein expression, and microRNAs miR-145, miR-210, miR-486 gene expression in cavernous tissue was performed by real time PCR. The immunohistochemical analysis showed little nuclear positive labeling for the protein PARP and AIF in the corpus cavernosum of control and ethanol treated animals. After analysis of miR-145, -210 and -486 microRNA expression in the 12 animals studied, no results were found with significant statistical difference between the control and alcoholized groups. The expression of AIF and PARP and their regulatory microRNAs involved in apoptotic process (miR-145, miR-210 and miR-486) were not altered in the corpus cavernosum of rats submitted to semivoluntary alcoholism.

RESUMEN: Estudios previos de nuestro grupo describieron las consecuencias del uso de etanol en la erección del pene. Sin embargo, los mecanismos moleculares que rodean a los microARN, el proceso de apoptosis y su relación con la disfunción eréctil asociada con el consumo de alcohol aún no se conocen bien. El objetivo de este análisis fue evaluar el mecanismo de apoptosis mediante la expresión de AIF y PARP, así como sus microARN reguladores: miR-145, miR-210 y miR-486, en el cuerpo cavernoso de ratas sometidas a un modelo de alcoholismo semivoluntario. Se dividieron 24 ratas Wistar en dos grupos: control (C) grupo de ratas tratadas con etanol al 20 % (A) durante siete semanas. Las muestras del cuerpo cavernoso se prepararon para el análisis inmunohistoquímico de la expresión de la proteína AIF y PARP, y la expresión del gen microRNAs miR-145, miR-210, miR-486 en tejido cavernoso se realizó por PCR en tiempo real. El análisis inmunohistoquímico mostró escaso etiquetado nuclear positivo para la proteína PARP y AIF en el cuerpo cavernoso de los animales de control y tratados con etanol. Después del análisis de la expresión de microARN miR-145, -210 y -486 no se encontraron resultados con diferencias estadísticas significativas entre los grupos control y alcoholizados. La expresión de AIF y PARP y sus microARN reguladores involucrados en el proceso apoptótico (miR-145, miR-210 y miR-486) no se alteraron en el cuerpo cavernoso de las ratas sometidas a alcoholismo semivoluntario.

AIF, PARP-1 and MicroRNA-9 expression in cerebral ischemia associated to alcoholism experimental model / Expresión de AIF, PARP-1 y MicroRNA-9 de isquemia cerebral asociado a un modelo experimental de alcoholismo

The chronic consumption of alcohol causes a worsening of the events that follow the cerebral ischemia. These events are regulated through the expression of several genes and microRNAs. The aimof this work was To analyze and describe the expression profile of PARP and AIF and miRNA-9 proteins in rats submitted to focal cerebral ischemia, associated or not with chronic alcoholism model. Methods: Twenty adult Wistar rats, subdivided into: control; ischemic; alcoholic and ischemic / alcoholized for immunohistochemical analysis and miRNA-9 gene expression. Results: There was a reduction in the protein expression of PARP-1 and a positive marking for AIF in the ischemic / alcoholized group. The miRNA-9 did not obtain significant expression. The association of ischemia with chronic alcohol use promoted a tendency to low expression of miRNA-9, low expression of PARP-1 and high expression of AIF, indicating an interference in the protective effect of miRNA-9 be observed in the other groups.

El consumo crónico de alcohol provoca un empeoramiento de los eventos que siguen a la isquemia cerebral. Estos eventos están regulados a través de la expresión de varios genes y microRNA. El objetivo de este trabajo fue analizar y describir el perfil de expresión de las proteínas PARP y AIF y microRNA-9 en ratas sometidas a isquemia cerebral focal, asociadas o no, con el modelo de alcoholismo crónico. Veinte ratas Wistar adultas se dividieron en: grupo control, isquémico alcohólico, e isquémico / alcoholizado para análisis inmunohistoquímico y expresión de genes microRNA-9. Resultados: Hubo una reducción en la expresión de proteínas de PARP-1 y un marcado positivo para AIF en el grupo isquémico / alcoholizado. No se observó una expresión significativa en el microRNA-9. La asociación de la isquemia con el consumo crónico de alcohol promovió una tendencia a la baja expresión de microRNA-9, baja expresión de PARP1 y alta expresión de AIF, lo que indica una interferencia en el efecto protector de microRNA-9 en los otros grupos.